Disseny de llibreria mutacional per mesurar l'estabilitat de totes les mutacions possibles en sod1

Identificador:  TFG:6614

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG6614

Autors:  Quiroga, Tomás

Resum:
La superòxid dismutasa 1 (SOD1) és una proteïna que neutralitza les espècies reactives d'oxigen (ROS). Les mutacions en SOD1 poden causar ELA. Aquest estudi té com a objectiu identificar mutacions que condueixen al plegament incorrecte de proteïnes mitjançant l'exploració mutacional profunda (DMS). L'enfocament DMS consisteix a crear una biblioteca mutacional de SOD1, utilitzant un assaig d'abundància de proteïnes (PCA) d'alt rendiment per seleccionar-lo i una seqüenciació profunda per mesurar l'impacte de les mutacions. En fusionar SOD1 amb l'enzim DHFR, vam realitzar un assaig d'abundància per quantificar l'efecte de les mutacions. Hem creat una biblioteca de 6000 mutacions SOD1 diferents per provar el seu impacte en el plegament de proteïnes i planegem utilitzar els resultats per distingir entre mutacions patògenes i no patògenes.