Validación de un procedimiento de análisis lipidómico mediante resonancia magnética nuclear

Identificador:  TFG:1616

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG1616

Autores:  Ozcariz García, Enrique

Resumen:
En la actualidad la lipidómica se encuentra en pleno auge. Sin embargo aún existen ciertas limitaciones asociadas a todo estudio lipidómico, entre las que destacan: un método de extracción adecuado (siendo el método de butanol:metanol el más apropiado), un correcto análisis de los resultados. La espectrometría de masas es la herramienta más utilizada pero, otras como la resonancia magnética nuclear están ganando protagonismo en este ámbito dadas las ventajas que presenta como la no necesidad de derivatización de la muestra o su elevada reproducibilidad y sensibilidad. En este trabajo se pretende validar un protocolo de análisis lipidómico mediante resonancia magnética nuclear. Para ello, se estudió qué procedimiento de extracción es el más preciso y la estabilidad lipídica tras ser almacenadas las muestras a distintas temperaturas durante diferentes periodos de tiempo. Se observó que el procedimiento de extracción más preciso era el manual ya que es el que presentó los coeficientes de variación más bajos. Sin embargo, se demostró que la recuperación de glicerofosfolípidos y esfingolípidos era superior cuando se llevaban a cabo las extracciones con el robot. En lo referente a la estabilidad lipídica no se observó la estabilidad esperada a las condiciones de almacenamiento establecidas, pero tampoco se detectó un proceso de degradación lipídica. Factores como el error experimental y la propia variabilidad intrínseca de los lípidos han podido contribuir a la obtención de resultados tan variables. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto la necesidad de optimizar el protocolo de extracción con el robot ya que la manual no es compatible con una técnica de alto rendimiento como es la resonancia magnética nuclear. De igual manera, es necesario el estudio de factores adicionales (como los ciclos de congelación y descongelación a los que se ven sometidos las muestras) para una validación completa del protocolo presentado en este trabajo.