Caracterización de células madre mesenquimales ovinas y desarrollo de modelos celulares in vitro de enfermedades priónicas

Identificador:  TFG:2122

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG2122

Autores:  García Rey, Andrea

Resumen:
Las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET) son un grupo de enfermedades neurodegenerativas letales que están causadas por la acumulación de la proteína prion en su isoforma patológica (PrPSc) en células nerviosas. El desconocimiento de los mecanismos moleculares y la ausencia de tratamiento específico, lleva a la creación de modelos celulares que permitan estudiar las EET en profundidad. El objetivo de este Trabajo Fin de Grado es evaluar el potencial de las células madre mesenquimales (MSCs), de distinto genotipo para el gen PRNP, para el desarrollo de modelos in vitro de las EET. Para ello, se utilizaron 3 cultivos de MSCs, confirmando en primer lugar el origen mesenquimal de las células mediante el estudio de su capacidad de diferenciación en los linajes mesodérmicos y la expresión de algunos marcadores de superficie específicos. Se estudió la plasticidad de las MSCs mediante la diferenciación hacia NSC (célula madre neuronal) en condiciones de crecimiento crecimiento en monocapa (NSCs) y formación de neuroesferas (MSC-NP). Las MSCs fueron sometidas a estudios de infectividad tanto en condiciones basales como de diferenciación hacia NSCs, con cultivos e inóculos de scrapie procedentes de ovinos portadores de distintos genotipos para PRNP. Las MSCs fueron capaces de diferenciarse en adipocitos, condrocitos y osteocitos pero la expresión de marcadores de superficie fue variable. La diferenciación hacia NSC en monocapa mostró cambios en la morfología celular, aunque el análisis del marcador intracelular no validó la diferenciación. En la formación de neuroesferas, la baja expresión de genes de linaje mesodermal evidenció la pérdida de las características de origen mesodérmico en las células diferenciadas. Tanto en condiciones basales como de diferenciación, la inoculación con scrapie indujo la proliferación celular en los distintos cultivos. Los resultados sobre la multiplicación del prion variaron en función del genotipo celular.