Novel potentiometric biosensor for amino acids detection

Identificador:  TFM:298

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFM298

Autores:  Spasojević, Irena

Resumen:
Es presenta el desenvolupament d'un nou sensor enzimàtic basat en paper per a la detecció potenciomètrica d'aminoàcids. El sensor consta d'un paper platinitzat que actua com a substrat sensible a la redox i una capa de Nafió sobre la qual l'enzim L-Amino Acid Oxidasa (LAAO) és immobilitzat en matriu polimèrica de quitosan. El Nafió actua com a barrera permeable selectiva, evitant el transport d'espècies carregades negativament mentre és permeable a espècies neutrals com H²O². La composició del biosensor va ser optimitzada i es va explorar la resposta a diferents aminoàcids amb diferents cadenes laterals. Els aminoàcids no polars amb grups aromàtics (Phe, Tyr i Trp) van informar de la sensibilitat més alta (-32,3, -56,1 i -45,3 mV/dècada respectivament) dins del rang lineal de 10-4 a 10-3 M, és a dir, el rang clínic normal dels aminoàcids presents en el plasma humà. Tots els altres aminoàcids mostrats mostren una resposta gairebé insignificant. L'única excepció és Cys, que mostra resposta a causa de les seves pròpies característiques redox. Per tant, ja que la concentració de Cys es pot determinar de forma independent, el sensor desenvolupat per aquesta proteïna podria trobar una possible aplicació per a la detecció del contingut total d'aminoàcids aromàtics.