Data d'alta al repositori: 2015-02-17
Resum: La saliva media la eliminación de bacterias intracelulares Resumen Mycobacterium tuberculosis es capaz de infectar y sobrevivir dentro macrófagos, lo que es crucial para el desarrollo de la tuberculosis. La limpieza de dicha infección es difícil, lo que consecuentemente lleva a una infección persistente. Sin embargo, recientemente ha sido descubierto un nuevo proceso en macrófagos, en el cual éstos forman Trampas Extracelulares de macrófagos (Macrophage Extracellular traps, METs), las cuales se basan en un mecanismo similar a la apoptosis, que posiblemente podría ayudar en la eliminación del patógeno. Este proceso también ha sido observado en neutrófilos (NETs), activado por la molécula de ácido siálico contenida en las mucinas, uno de los componentes de la saliva (datos no publicados). A su vez, este proceso incluye un proceso llamado autofagia que resulta en la rotura de proteínas estructurales de las membranas nuclear y plasmática, lo que facilita la liberación del DNA. Además, experimentos previos también han indicado que el intracelular Mycobacterium tuberculosis es capaz de ser eliminado a través de llevar a cabo el proceso de autofagia en la célula infectada. Sorprendentemente, observamos un proceso similar en el que, monocitos purificados procedentes de muestras de sangre demostraban un incremento de la eliminación de microbacterias intracelulares después de su exposición a muestras de saliva. En este proyecto, a través de la realización de diferentes experimentos, los que hemos ido optimizando continuamente, expusimos monocitos infectados con microbacteria (tanto líneas celulares como monocitos purificados de muestras de sangre) a muestras de saliva y examinamos el nivel de supervivencia de las microbacterias. Nuestros resultados indicaron que la saliva media la eliminación de bacterias intracelulares, mientras que el ácido siálico no muestra aparentemente ningún efecto. No obstante, hay indicios de que el componente activo de la saliva embarca el ácido siálico. Así que, pese a que los resultados no han sido concluyentes, los resultados preliminares son prometedores, lo que hace factible el estudio de la posibilidad de que la saliva pueda contener algún componente o componentes que sean capaces de estimular monocitos de tal manera que eliminen microbacterias y otros patógenos intracelulares. Saliva-mediated killing of intracellular bacteria Summary Mycobacterium tuberculosis is able to infect and survive in macrophages and this is pivotal for development of tuberculosis. Clearing of infection is difficult, which consequently leads to persistent infection. However, a novel process recently in macrophages has been discovered where macrophages form macrophages Extracellular Traps (METs), which is a mechanism similar to apoptosis that possible, could help to eliminate the pathogen. This process has also been observed in neutrophils (NETs), activated by a sialic-acid containing salivary component, mucins (data non-published). This process involves a process called autophagy, which results in the breakdown of structural proteins of the nuclear and plasma membrane that in turn facilitates the release of DNA. Previous studies also indicate that intracellular Mycobacterium tuberculosis is subject to elimination through autophagy of the infected cell. Surprisingly, we observed a similar effect wherein, peripheral blood monocytes demonstrated increased killing of intracellular mycobacteria after exposure to saliva. In this work, through different experiments, which we have been optimizing continuously, we exposed mycobacteria-infected monocytes (cell lines and peripheral blood monocytes) to saliva and examined the intracellular survival rate of the mycobacteria. Our result indicated that saliva stimulation mediated killing of intracellular mycobacteria but that free sialic acid did not show any apparent effect. Nevertheless, there are indications that the active component in saliva encompasses a sialic acid containing moiety. Though the results were not conclusive, promising preliminary results make it feasible to further explore the possibility that saliva could contain component(s) stimulating monocytes to kill mycobacteria and other intracellular pathogens. La saliva intervé en l’eliminació de bactèries intracel·lulars Resum Mycobacterium tuberculosis és capaç d’infectar i sobreviure dins de macròfags, el qual és crucial pèl desenvolupament de la tuberculosis. La neteja d’aquesta infecció es difícil, el que conseqüentment porta a una infecció persistent. No obstant, recentment s’ha descobert un nou procés en macròfags, en el qual aquests formen trampes extracel·lulars de macròfags (Macrophage Extracellular traps, METs), les quals estan basades en un mecanisme similar a l’apoptosi, que possiblement podria ajudar en l’eliminació del patogen. Aquest procés també ha sigut observat en neutròfils (NETs), activat per una molècula anomenada àcid sialic continguda en les mucines, un component de la saliva (dades no publicades). A la vegada, aquest procés inclou un altre procés anomenat autofàgia que resulta en la ruptura de proteïnes estructurals de les membranes nuclear i plasmàtica, el que facilita l’alliberació del DNA. A més, experiments previs també han indicat que el intracel·lular Mycobacterium tuberculosis és capaç de ser eliminat a través del procés d’autofàgia a la cèl·lula infectada. Sorprenentment, vam observar un procés similar en el que, monòcits purificats procedents de mostres de sang demostraven un increment en l’eliminació de micobacteris intracel·lulars desprès de la seva exposició a mostres de saliva. En aquest projecte, a través de la realització de diferents experiments, els quals hem estat optimitzant contínuament, vam exposar els monòcits infectats amb micobacteris (tant línies cel·lulars com monòcits purificats de mostres de sang) a mostres de saliva i vam examinar el nivell de supervivència dels micobacteris. Els nostres resultats van indicar que la saliva intervenia en l’eliminació de bactèries intracel·lulars, metre que l’àcid sialic no mostra aparentment cap efecte. Tot i així, hi ha indicis de que el component actiu de la saliva avarca l’àcid sialic. Així doncs, tot i que els resultats no han sigut concloents, els resultats preliminars son prometedors, el que fa factible l’estudi de la possibilitat de que la saliva pugui contenir algun component o components que siguin capaços d’estimular monòcits de tal manera que eliminin micobacteris i altres patògens intracel·lulars.
Matèria: Biotecnologia
Idioma: en
Codirector del treball: Sørensen, Ole
Àrees temàtiques: Bioquímica y biotecnología Biochemistry and Biotechnology Bioquímica i biotecnologia
Departament: Bioquímica i Biotecnologia
Estudiant: García García, Juncal
Curs acadèmic: 2013-2014
Títol en diferents idiomes: Saliva media la eliminación de bacterias intracelulares Saliva-mediated killing of intracellular bacteria Saliva media la eliminació de bactèries intracel·lulars
Data de la defensa del treball: 2014-06-26
Drets d'accés: info:eu-repo/semantics/openAccess
Paraules clau: macrófagos, microbacterias, saliva macrophages, mycobacteria, saliva macròfags, micobacteris, saliva
Confidencialitat: No
Crèdits del TFG: 18
Títol en la llengua original: Saliva-mediated killing of intracellular bacteria
Director del projecte: Romeu Figuerola, Antoni
Ensenyament(s): Bioquímica i Biologia Molecular
Entitat: Universitat Rovira i Virgili (URV)
Repositori URV