Validació d'un procediment d'anàlisi lipidómico mitjançant ressonància magnètica nuclear

Identificador:  TFG:1616

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG1616

Autors:  Ozcariz García, Enrique

Resum:
En l'actualitat la lipidómica es troba en plena expansió. No obstant això encara hi ha certes limitacions associades a tot estudi lipidómico, entre les quals destaquen: un mètode d'extracció adequat (sent el mètode de butanol: metanol el més apropiat), una correcta anàlisi dels resultats. L'espectrometria de masses és l'eina més utilitzada però, altres com la ressonància magnètica nuclear estan guanyant protagonisme en aquest àmbit donades les avantatges que presenta com la no necessitat de derivatització de la mostra o la seva elevada reproductibilitat i sensibilitat. En aquest treball es pretén validar un protocol d'anàlisi lipidómico mitjançant ressonància magnètica nuclear. Per a això, es va estudiar quin procediment d'extracció és el més precís i l'estabilitat lipídica després de ser emmagatzemades les mostres a diferents temperatures durant diferents períodes de temps. Es va observar que el procediment d'extracció més precís era el manual ja que és el que va presentar els coeficients de variació més baixos. No obstant això, es va demostrar que la recuperació de glicerofosfolípids i esfingolípids era superior quan es duien a terme les extraccions amb el robot. Pel que fa a l'estabilitat lipídica no es va observar l'estabilitat esperada a les condicions d'emmagatzematge establertes, però tampoc es va detectar un procés de degradació lipídica. Factors com l'error experimental i la pròpia variabilitat intrínseca dels lípids han pogut contribuir a l'obtenció de resultats tan variables. Els resultats obtinguts posen de manifest la necessitat d'optimitzar el protocol d'extracció amb el robot ja que la manual no és compatible amb una tècnica d'alt rendiment com és la ressonància magnètica nuclear. De la mateixa manera, és necessari l'estudi de factors addicionals (com els cicles de congelació i descongelació a què es veuen sotmesos les mostres) per a una validació completa del protocol presentat en aquest treball.