Caracterización de células madre mesenquimales ovinas y desarrollo de modelos celulares in vitro de enfermedades priónicas

Identificador:  TFG:2122

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG2122

Autors:  García Rey, Andrea

Resum:
Les encefalopaties espongiformes transmissibles (EET) són un grup de malalties neurodegeneratives letals que estan causades per l'acumulació de la proteïna prió a la seva isoforma patològica (PrPSc) en cèl·lules nervioses. El desconeixement dels mecanismes moleculars i l'absència de tractament específic porta a la creació de models cel·lulars que permetin estudiar les EET en profunditat. L'objectiu d'aquest Treball Fi de Grau és avaluar el potencial de les cèl·lules mare mesenquimals (MSCs), de genotip diferent per al gen PRNP, per al desenvolupament de models in vitro de les EET. Per fer-ho, es van utilitzar 3 cultius de MSCs, confirmant en primer lloc l'origen mesenquimal de les cèl·lules mitjançant l'estudi de la seva capacitat de diferenciació en els llinatges mesodèrmics i l'expressió d'alguns marcadors de superfície específics. Es va estudiar la plasticitat de les MSC mitjançant la diferenciació cap a NSC (cèl·lula mare neuronal) en condicions de creixement creixement en monocapa (NSCs) i formació de neuroesferes (MSC-NP). Les MSCs van ser sotmeses a estudis d'infectivitat tant en condicions basals com de diferenciació cap a NSCs, amb cultius i inòculs de scrapie procedents d'ovins portadors de diferents genotips per a PRNP. Les MSCs van ser capaces de diferenciar-se en adipòcits, condròcits i osteòcits, però l'expressió de marcadors de superfície va ser variable. La diferenciació cap a NSC en monocapa va mostrar canvis a la morfologia cel·lular, tot i que l'anàlisi del marcador intracel·lular no va validar la diferenciació. En la formació de neuroesferes, la baixa expressió de gens de llinatge mesodermal va evidenciar la pèrdua de les característiques d'origen mesodèrmic a les cèl·lules diferenciades. Tant en condicions basals com de diferenciació, la inoculació amb scrapie va induir la proliferació cel·lular en els diferents cultius. Els resultats sobre la multiplicació del prió van variar en funció del genotip cel·lular.