Data d'alta al repositori: 2025-12-03
Resum: La S-acilación es una modificación lipídica reversible que regula la localización, estabilidad y función de las proteínas, con funciones clave en la señalización y la enfermedad. Sin embargo, su estudio se ve limitado por la baja eficiencia de ionización de los hidroxamatos de ácidos grasos (FAH), liberados tras la escisión de la hidroxilamina. Para mejorar la sensibilidad de detección, los FAH se derivatizaron con cloruro de piridina-2-carbonilo y 4,4-dimetoxipiperidina, lo que mejoró su señal en HPLC-HRMS. Este método optimizado permitió un análisis cuantitativo y cualitativo robusto de la S-acilación, como se demostró en la línea celular humana Neuro-2a (N2a). Este enfoque proporciona una herramienta poderosa para investigar el S-aciloma heterogéneo y su desregulación en enfermedades neurodegenerativas como la lipofuscinosis neuronal ceroidea (CLN1).; S-acylation is a reversible lipid modification that regulates protein localization, stability, and function, with key roles in signaling and disease. However, its study is limited by the low ionization efficiency of fatty acid hydroxamates (FAHs), released upon hydroxylamine cleavage. To improve detection sensitivity, FAHs were derivatized with pyridine-2-carbonyl chloride and 4,4-dimethoxypiperidine, enhancing their signal in HPLC-HRMS. This optimized method enabled robust quantitative and qualitative analysis of S-acylation, as demonstrated in the human Neuro-2a (N2a) cell line. This approach provides a powerful tool for investigating the heterogeneous S-acylome and its dysregulation in neurodegenerative diseases like neuronal ceroid lipofuscinosis (CLN1).; La S-acilació és una modificació reversible dels lípids que regula la localització, l'estabilitat i la funció de les proteïnes, amb un paper clau en la senyalització i la malaltia. Tanmateix, el seu estudi està limitat per la baixa eficiència d'ionització dels hidroxamats d'àcids grassos (FAH), alliberats durant l'escissió de la hidroxilamina. Per millorar la sensibilitat de detecció, els FAH es van derivatitzar amb clorur de piridina-2-carbonil i 4,4-dimetoxipiperidina, millorant el seu senyal en HPLC-HRMS. Aquest mètode optimitzat va permetre una anàlisi quantitativa i qualitativa robusta de la S-acilació, tal com es demostra a la línia cel·lular humana Neuro-2a (N2a). Aquest enfocament proporciona una eina potent per investigar l'S-aciloma heterogeni i la seva desregulació en malalties neurodegeneratives com la lipofuscinosi ceroide neuronal (CLN1).
Matèria: Obesitat
Idioma: en
Àrees temàtiques: Bioquímica y biotecnología; Biochemistry and biotechnology; Bioquímica i biotecnologia
Departament: Bioquímica i Biotecnologia
Estudiant: Villaverde Nogues, Jahaciel
Curs acadèmic: 2024-2025
Títol en diferents idiomes: Detección mejorada en la prueba de hidroxilamina para el análisis cuantitativo y cualitativo de los ácidos grasos S-acilados en proteínas.; Detecció millorada en la proba d'hidroxilamina per a l'anàlisi quantitativa i qualitativa dels àcids grassos S-acilats en proteïnes.
Data de la defensa del treball: 2025-06-20
Drets d'accés: info:eu-repo/semantics/openAccess
Paraules clau: S-acilación, hidroxamatos de ácidos grasos, derivatización; S-acylation, fatty acid hydroxamates, derivatization; S-acilació, hidroxamats d'àcids grassos, derivatització
Confidencialitat: No
Títol en la llengua original: Enhanced detection in hydroxylamine probe for the quantitative and qualitative analysis of S-acylated fatty acids on proteins
Director del projecte: Fernández Larrea, Juan Bautista
Ensenyament(s): Bioquímica i Biologia Molecular
Entitat: Universitat Rovira i Virgili (URV)
Repositori URV