L'us de microglia primària de ratolí per investigar el rol de C5a induint una resposta inflamatòria a Aβ

Identificador:  TFG:105

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG105

Autors:  Marsal Cots, Anaïs

Resum:
Els macròfags del sistema immunològic del cervell, la microglia, representa al voltant del 10% de la totalitat de les cèl·lules del sistema nerviós. Les cèl·lules de la microglia pateixen una ràpida transformació des d’un estat quiescent fins a un fenotip activat per respondre a les situacions patològiques, i aquest fenotip està caracteritzat per un increment de la citotoxicitat i de la motilitat. Es pensa que els productes de l’activació del complement, inclòs C5a, juguen un paper fonamental en la patogènesi de nombroses malalties neurològiques. Els cultius primaris de neurones i micròglia preparats a partir de teixit nerviós de rosegadors representen una eina poderosa no només per estudiar la contribució individual dels diferents tipus cel·lulars (com neurones o glia) en la progressió de les malalties, sinó també per investigar el rol de les interaccions glia-neurones durant el desenvolupament de la malaltia. Se sap que l’amiloide-β fibril·lar (fAβ) te alguns efectes tòxics directament en neurones, però la presència de micròglia activada als llocs on es deposita l’amiloide-β en la malaltia de l’Alzheimer suggereix que aquestes cèl·lules també podrien contribuir a la progressió de la malaltia. La microglia cultivada in vitro allibera òxid nítric (NO) quan se li afegeix l’amiloide-β o altres molècules co-estimulatòries com IFN-γ or LPS. Els cultius primaris de micròglia es van tractar amb o sense C5a en la presència o absència d’amiloide-β fibril·lar (1-42) 20μM per tal de determinar si C5a podia millorar sinèrgicament la producció de NO suscitat per fAβ. Degut a que les cèl·lules de la microglia són una població heterogènia i extremadament sensible, a la majoria dels nostres experiments vam trobar una resposta sinèrgica en les cèl·lules tractades amb fAβ i C5a, recolzant així la nostra hipòtesi de que C5a i fAβ produeix sinèrgia per millorar la producció d’òxid nítric. No obstant, la variabilitat dels resultats obtinguts al llarg dels experiments desenvolupats pot ser explicada pel fet de que la microglia és extremadament sensible a les menors alteracions del microambient del sistema nerviós central.