El uso de microglia primaria de ratón para investigar el rol de C5a induciendo una respuesta infamatoria en Aβ

Identificador:  TFG:105

Handle: https://hdl.handle.net/20.500.11797/TFG105

Autores:  Marsal Cots, Anaïs

Resumen:
Los macrófagos del sistema inmunológico del cerebro, la microglia, representa en torno al 10% de la totalidad de las células del sistema nervioso. Las células de la microglia sufren una rápida transformación des de un estado quiescente hasta a un fenotipo activo para responder a las situaciones patológicas, y este fenotipo está caracterizado por un incremento de la citotoxicidad y de la motilidad. Se piensa que los productos de la activación del complemento, incluido C5a, juegan un papel fundamental en la patogénesis de numerosas enfermedades neurológicas. Los cultivos primarios de neuronas y microglia preparados a partir del tejido nervioso de roedores representan una herramienta poderosa no solo para estudiar la contribución individual de los diferentes tipos celulares (como neuronas o glia) en la progresión de las enfermedades, sino también para investigar el rol de las interacciones glia-neuronas durante el desarrollo de la enfermedad. Se sabe que el amiloide-β fibrilar (fAβ) tiene algunos efectos tóxicos directamente en neuronas, pero la presencia de microglia activada a los lugares donde se deposita el amiloide-β en la enfermedad del Alzheimer sugiere que estas células también podrían contribuir a la progresión de la enfermedad. La microglia cultivada in vitro libera óxido nítrico (NO) cuando se le añade el amiloide-β u otras moléculas co-estimulatorias como IFN-y o LPS. Los cultivos primarios de microglia se trataron con o sin C5a en la presencia o ausencia de amiloide-β fibrilar (1-42) 20μM para determinar si C5a podía mejorar sinérgicamente la producción de NO suscitado por fAβ. Aunque las células de la microglia son una población heterogénea y extremadamente sensible, la mayoría de nuestros experimentos encontraron una respuesta sinérgica en las células tratadas con fAβ y C5a, apoyando así nuestra hipótesis de que fAβ y C5a producen sinergia para mejorar la producción de óxido nítrico. No obstante, la variabilidad de los resultados obtenidos a lo largo de los experimentos desarrollados puede ser explicada por el hecho de que la microglia es extremadamente sensible a las menores alteraciones del microambiente del sistema nervioso central.