Data d'alta al repositori: 2018-10-16
Resum: La Encefalitis de Rasmussen (ER) es un trastorno epiléptico progresivo poco frecuente con etiología desconocida. Se caracteriza por inflamación hemisférica unilateral, epilepsia focal resistente a los medicamentos y deterioro neurológico y cognitivo progresivo. Una de las características histopatológicas de la ER es la infiltración de células T, sin embargo, poco se sabe de su presencia en lesiones activas, así como de su fenotipo y estado de activación en las primeras etapas de la enfermedad. (Varadkar et al., 2014) En el presente estudio se analizó en detalle el fenotipo y el estado de activación de los linfocitos T gamma delta (γδ) en los diferentes estadios de RE. Se prestó especial atención a las células T citotóxicas con la capacidad de atacar las neuronas, provocando pérdida neuronal. Estos estudios se realizaron mediante análisis cualitativo y cuantitativo por microscopía óptica y microscopía de fluorescencia confocal con diversos marcadores para células T. La selección de marcadores consistió en anticuerpos contra todas las células T (CD3) y contra linfocitos T γδ (γδTCR). Para identificar si las células T γδ tienen una función reguladora, se analizó la expresión de la citoquina interferón gamma (IFN-γ). Las tinciones IHC mostraron que los linfocitos T γδ no constituyen una población específica en estadios tempranos de RE. Sin embargo, tienen la capacidad de atacar a las neuronas, lo que lleva a la conclusión de que son capaces de generar pérdida neuronal. Además, también se ha demostrado que constituyen una población celular capaz de expresar IFN-γ, sugiriendo que podrían ser parcialmente responsables de la activación microglial en RE debido a la producción de esta citoquina. Rasmussen Encephalitis (RE) is a rare progressive epileptic disorder with unknown aetiology. It is characterized by unilateral hemispheric inflammation, drug-resistant focal epilepsy and progressive neurological and cognitive deterioration. One of the histopathological hallmarks of RE is T cell infiltration, however, little is known regarding their presence in active lesions as well as their phenotype and activation state at early stages of the disease. (Varadkar et al., 2014) In the present study, we analysed in detail the phenotype and activation state of gamma delta (γδ) T lymphocytes in the different stages of RE. Here, specific attention was paid to cytotoxic T cells with the ability to attack neurons, leading to neuronal loss. These studies were performed by qualitative and quantitative analysis by light microscopy and confocal fluorescence microscopy with various markers for T cells. The selection of markers consisted of antibodies against all T cells (CD3) and against γδ T lymphocytes (γδTCR). To identify if γδ T cells have a potential regulatory function, we then analysed the expression of the cytokine gamma-interferon (IFN-γ). IHC stainings showed that γδ T lymphocytes do not constitute a specific population in early stages of RE. Nevertheless, they have the ability of targeting neurons, leading to the conclusion that they are capable of generating neuronal loss. In addition, it has also been proved that they constitute a cell population capable of expressing IFN-γ, suggesting that γδ T lymphocytes might be partially responsible for microglial activation in RE due to the production of this cytokine. L'encefalitis de Rasmussen (RE) és un trastorn epilèptic progressiu poc freqüent d'etiologia desconeguda. Es caracteritza per inflamació hemisfèrica unilateral, epilèpsia focal resistent als fàrmacs i deteriorament neurològic i cognitiu progressiu. Una de les característiques histopatològiques de la RE és la infiltració de cèl·lules T, però, es coneix poc sobre la seva presència en lesions actives, així com el seu fenotip i estat d'activació en les primeres etapes de la malaltia. (Varadkar et al., 2014) En el present estudi, hem analitzat amb detall el fenotip i l'estat d'activació dels limfòcits T gamma delta (γδ) en les diferents etapes de l'ER. Aquí, es va prestar atenció específica a les cèl·lules T citotòxiques amb la capacitat d'atacar les neurones, donant lloc a la pèrdua neuronal. Aquests estudis es van realitzar mitjançant anàlisi qualitativa i quantitativa mitjançant microscòpia de llum i microscòpia de fluorescència confocal amb diversos marcadors per a cèl·lules T. La selecció de marcadors va consistir en anticossos contra totes les cèl·lules T (CD3) i contra limfòcits T γδ (γδTCR). Per identificar si les cèl·lules T γδ tenen una funció reguladora potencial, es va analitzar l'expressió de la citocina gamma-interferó (IFN-γ). Les tincions IHC van demostrar que els limfòcits T γδ no constitueixen una població específica en les primeres etapes de RE. No obstant això, tenen la capacitat d'orientar les neurones, la qual cosa porta a la conclusió que són capaços de generar pèrdua neuronal. A més, també s'ha demostrat que constitueixen una població cel·lular capaç d'expressar IFN-γ, cosa que suggereix que els limfòcits T γδ podrien ser parcialment responsables de l'activació de la microglia en RE a causa de la producció d'aquesta citocina.
Matèria: Bioquímica i biotecnologia
Idioma: en
Codirector del treball: Bauer, Jan
Àrees temàtiques: Bioquímica i biotecnologia Biochemistry and biotechnology Bioquímica y biotecnología
Departament: Bioquímica i Biotecnologia
Estudiant: Vila Borrego, Irene
Curs acadèmic: 2017-2018
Títol en diferents idiomes: Anàlisi dels limfócits T γδ a la encefalitis de Rasmussen Analysis of γδ T lymphocytes in Rasmussen's encephalitis Analísis de los linfócitos T γδ en la encefalitis de Rasmussen
Data de la defensa del treball: 2018-06-27
Drets d'accés: info:eu-repo/semantics/openAccess
Paraules clau: encefalitis de Rasmussen, limfócits T γδ, interferó γ rasmussen's encephalitis, δ T lymphocytes, interferon γ encefalitis de Rasmussen, Linfocitos T γδ, interferón γ
Confidencialitat: No
Crèdits del TFG: 9
Títol en la llengua original: Analysis of γδ T lymphocytes in Rasmussen's encephalitis
Director del projecte: García Sánchez, Dania
Ensenyament(s): Biotecnologia
Entitat: Universitat Rovira i Virgili (URV)
Repositori URV